فروشگاه اینترنتی کالا زیست

پروتکل ساخت کامپتنت الکتریکی

• یک تک کلون از باکتری E.coli در 10 میلی‌لیتر محیط LB به مدت 12 ساعت در 37 درجه به همراه شیک کردن کشت داده میشود.
• نیم سی سی از کشت شبانه فوق به 50 سی سی محیط مایع LB اضافه شده و به مدت 3 الی 4 ساعت (تا زمانی که شدت جذب در OD 600 نانومتر به 0.5 برسد) در شیکر انکوباتور 37 درجه کشت داده میشود.
• کشت باکتری به یک فالکون 50 میلی‌لیتری منتقل و در دمای4 درجه و دور rpm 3500 به مدت 15 دقیقه سانتریفیوژ شود.
• رسوب حاصل در 50 میلی‌لیتر محلول سرد آب مقطر سرد استریل حل شده و 10 دقیقه روی یخ قرار داده شود.
• سانتریفیوژ مانند مرحله قبل انجام شود.
• رسوب حاصل در 25 میلی‌لیتر محلول سرد آب مقطر سرد استریل حل شده و 10 دقیقه روی یخ قرار داده شود.
• سانتریفیوژ مانند مرحله قبل انجام شود.
• به رسوب حاصل 12 میلی‌لیتر محلول سرد آب مقطر سرد استریل اضافه شده و سانتریفیوژ انجام شود.
• رسوب حاصل در 600 میکرو‌لیتر محلول سرد آب مقطر سرد استریل حل شده و در حجم‌های 100 میکرولیتری تقسیم شده و از آنها در همان روز استفاده شود.  

نکته: تمام مراحل در کنار شعله انجام شود تا از ایجاد آلودگی جلوگیری شود.